タンパク質濃度計算機

カテゴリー：生物学
- 2025年7月28日
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典型的な値は0.5から2.0の範囲です
標準キュベットの光路長は1 cmです
測定前にサンプルが希釈された場合 (例: 5 = 1:5の希釈)

280 nm（A280）での吸光度を使用してタンパク質の濃度を求めるには、ビール・ランバートの法則を使用します：

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

ここで：

  • \( C \) = タンパク質濃度（mg/mL）
  • \( A \) = 280 nmでの吸光度
  • \( \epsilon \) = 消光係数（L·g⁻¹·cm⁻¹）
  • \( l \) = キュベットの光路長（cm）

タンパク質濃度計算機とは何ですか？

タンパク質濃度計算機は、以下のような異なる方法を使用してタンパク質濃度を求めるのに役立ちます：

  • 280 nmでの吸光度（A280）：芳香族アミノ酸に基づく迅速で非破壊的な方法。
  • ブラッドフォードアッセイ：染料結合を使用した比色法。
  • BCA（ビシンコニン酸）アッセイ：銅還元と比色検出に依存する方法。
  • ロウリーアッセイ：タンパク質と銅の相互作用を利用した確立されたアプローチ。

計算機の使い方

タンパク質濃度を計算するための手順は次のとおりです：

  • 測定方法を選択します（A280、ブラッドフォード、BCA、またはロウリー）。
  • 吸光度、希釈係数、消光係数（必要に応じて）などの必要な値を入力します。
  • 標準曲線法（ブラッドフォード、BCA、またはロウリー）を使用する場合は、曲線パラメータを入力します。
  • 「計算」ボタンをクリックして濃度結果を取得します。

計算機を使用する利点

  • 濃度計算を自動化することで時間を節約します。
  • 柔軟性のために複数の測定方法をサポートします。
  • 特定の濃度を準備するための希釈計算機を含みます。
  • 手動計算における人的エラーを減少させます。

よくある質問（FAQs）

1. 吸光度（A280）法の精度はどのくらいですか？

A280法は純粋なタンパク質に対して一般的に正確ですが、核酸などの汚染物質の影響を受ける可能性があります。

2. すべてのタンパク質にブラッドフォードアッセイを使用できますか？

ブラッドフォードアッセイはほとんどのタンパク質に対してうまく機能しますが、タンパク質の組成によって変動する結果が得られることがあります。

3. BCAアッセイの利点は何ですか？

BCA法は洗剤との互換性が高く、ブラッドフォードよりも広い線形範囲を持っています。

4. A280の消光係数をどのように選択しますか？

既知のタンパク質の公表された値を使用するか、アミノ酸組成に基づいて消光係数を計算します。

5. なぜ希釈係数が必要ですか？

サンプルが測定前に希釈されている場合、計算された濃度に希釈係数を掛けて正しい最終濃度を得る必要があります。